摘要
构建人纤溶酶原饼环区 5( hPK
5) 基因的原核可溶性表达

摘要
构建人纤溶酶原饼环区 5( hPK
5) 基因的原核可溶性表达载体并进行表达和纯化, 获取大
量高纯度、具有生物活性的 hPK
5 蛋白。以纤溶酶原 cDNA 为模板, PCR 扩增了 hPK
5 基因, 经过
适当酶切后构建表达载体 pET22b( + )
hPK
5, 转入大肠杆菌 BL21( DE3) 进行表达并经组氨酸亲
和层析获得纯化。带有重组质粒 pET22b( + )
hPK
5 的大肠杆菌经 IPTG 诱导后以可溶性形式表
达16kDa 的蛋白, 其表达量占菌体总蛋白的 30% 以上, 纯化后目的蛋白纯度达 95% 以上, Western
印迹表明重组蛋白具有His
tag 抗原活性。构建了 pET22b( + )
hPK
5 重组质粒并成功地在大肠
杆菌中获得可溶性表达, 为获得大量hPK
5 基因工程产品奠定了实验基础。
关键词
人纤溶酶原饼环区 5
基因克隆
原核表达

Kết quả (Việt) 1:

Bản tóm tắt của con người plasminogen pie District 5 (hPK 5) gen trong biểu thức so vector và biểu hiện và thanh lọc của hòa tan, được một số lượng lớn của
, hPK 5 của protein hoạt tính sinh học với độ tinh khiết cao. Plasminogen cDNA như mẫu, Đảng Cộng sản Romania khuếch đại của hPK 5 gen và xây dựng sau khi
thích hợp enzym biểu hiện vector pET22b (), hPK 5, chuyển sang Escherichia coli BL21 (DE3) và biểu hiện Histidine
và sắc kí để có được làm sạch. Với pET22b tái tổ hợp plasmid (), hPK 5 sau cảm ứng IPTG trong Escherichia coli như là một hình thức hòa tan của bảng
Albumin tạo 16kDa, chiếm hơn 30% tất cả chất đạm biểu hiện, Độ tinh khiết protein tinh khiết mục tiêu đạt trên 95%, Tây
blot phương Tây đã chỉ ra rằng với từ khóa của mình là tái tổ hợp kháng nguyên kích hoạt. Xây dựng () pET22b, hPK 5 tái tổ hợp plasmid và thành công nhận được biểu thức
trực khuẩn coliform, rất nhiều hPK 5 sản phẩm kỹ thuật di truyền thí nghiệm đặt nền móng.
Từ khóa của con người plasminogen pie 5 trung tâm gen nhân bản, biểu thức so

Kết quả (Việt) 2:

Tóm tắt? Xây dựng plasminogen người Kringle 5 (HPK? 5) hòa tan vector biểu hiện prokaryote và sự biểu hiện và thanh lọc, để có được một lượng lớn
số lượng có độ tinh khiết cao, với HPK hoạt động sinh học 5 protein?. Để plasminogen cDNA như một khuôn mẫu, PCR khuếch đại HPK? 5 gen, thông qua
việc xây dựng đúng đắn của các vector biểu hiện tiêu hóa pET22b (+)? HPK? 5, chuyển thành E. coli BL21 (DE3) biểu hiện và histidine mối quan hệ
sắc ký để có được tinh khiết. Với các plasmid tái tổ hợp pET22b (+)? HPK? E. 5 sau khi IPTG cảm ứng trong một bảng dạng hòa tan
của protein 16kDa, hơn 30% của tổng số biểu hiện protein vi khuẩn của nó, làm sạch protein sau khi hơn 95% độ tinh khiết , Tây
thấm cho thấy protein tái tổ hợp từ khóa hoạt động kháng nguyên? Ngài. Xây dựng các pET22b (+)? HPK? 5 plasmid tái tổ hợp và thành công trong E.
coli biểu hiện tan thu được để có được một số lượng lớn các sản phẩm cơ khí HPK 5 gen cơ sở thử nghiệm?.
Từ khoá? Plasminogen Nhân Kringle 5 Cloning biểu prokaryote?